POVZETEK IN RAZLAGA TESTA
Leptospiroza se pojavlja po vsem svetu in je pogosta blaga do huda zdravstvena težava za ljudi in živali, zlasti na območjih z vročim in vlažnim podnebjem.Naravni rezervoarji leptospiroze so glodalci in številni udomačeni sesalci.Človeško okužbo povzroča L. interrogans, patogeni predstavnik rodu Leptospira.Okužba se širi z urinom živali gostiteljice.
Po okužbi so leptospire prisotne v krvi, dokler se ne očistijo po 4 do 7 dneh po nastanku anti-L.interrogans protitelesa, sprva razreda IgM.Kultura krvi, urina in cerebrospinalne tekočine je učinkovito sredstvo za potrditev diagnoze v 1. do 2. tednu po izpostavljenosti.Serološko odkrivanje antiL.tudi protitelesa interrogans je pogosta diagnostična metoda.Testi so na voljo v tej kategoriji: 1) mikroskopski test aglutinacije (MAT);2) ELISA;3) Indirektni fluorescentni testi protiteles (IFAT).Vendar pa vse zgoraj omenjene metode zahtevajo sofisticiran objekt in dobro usposobljene tehnike.
Leptospira IgG/IgM je preprost serološki test, ki uporablja antigene iz L. interrogans in hkrati zazna protitelesa IgG in IgM proti tem mikroorganizmom.Test lahko opravi neusposobljeno ali minimalno usposobljeno osebje, brez okorne laboratorijske opreme, rezultat pa je na voljo v 15 minutah.
NAČELO
Hitri testni komplet Leptospira IgG/IgM je kromatograf z bočnim tokom
imunski test.Testno kaseto sestavljajo: 1) bordo obarvana konjugirana blazinica, ki vsebuje rekombinantne antigene L. interrogans, konjugirane s koloidnim zlatom (konjugati Leptospira) in konjugati kunčjega IgG-zlata, 2) trak iz nitrocelulozne membrane, ki vsebuje dva testna trakova (trakova M in G) in kontrolni pas (C pas).Trak M je predhodno prevlečen z monoklonskim protičloveškim IgM za detekcijo anti-L.. interrogans IgM, trak G je predhodno prevlečen z reagenti za detekcijo anti-L.interrogans IgG, trak C pa je predhodno prevlečen s kozjim proti kunčjim IgG.
Ko je ustrezen volumen preskusnega primerka odmerjen v vdolbino za vzorec v kaseti, vzorec migrira s kapilarnim delovanjem po kaseti.IgM anti-L.. interrogans, če so prisotni v vzorcu, se bodo vezali na konjugate Leptospira.Imunokompleks se nato ujame na membrano s predhodno obloženim protitelesom proti humanemu IgM, pri čemer se tvori bordo obarvan pas M, kar kaže na pozitiven rezultat testa L. interrogans IgM.Če so IgG anti-L.. interrogans prisotni v vzorcu, se bodo vezali na konjugate Leptospira.Imunokompleks nato zajamejo predhodno prevlečeni reagenti na membrani, pri čemer se tvori bordo obarvan pas G, kar kaže na pozitiven rezultat testa IgG L. interrogans.
Odsotnost testnih pasov (M in G) pomeni negativen rezultat.Test vsebuje notranjo kontrolo (trak C), ki mora pokazati bordo obarvan trak imunokompleksa kozjega proti kunčjega IgG/konjugata kunčjega IgG-zlata, ne glede na razvoj barve na katerem koli testnem traku.V nasprotnem primeru je rezultat testa neveljaven in je treba vzorec ponovno testirati z drugo napravo.
