POVZETEK IN RAZLAGA TESTA
Tuberkuloza je kronična nalezljiva bolezen, ki jo povzroča predvsem M. TB hominis (Kochov bacil), občasno M. TB bovis.Glavna tarča so pljuča, vendar je lahko okužen kateri koli organ.
Tveganje za okužbo s tuberkulozo se je v 20. stoletju eksponentno zmanjšalo.Vendar pa je nedavni pojav sevov, odpornih na zdravila1, zlasti med bolniki z aidsom2, ponovno obudil zanimanje za tuberkulozo.Pojavnost okužbe je bila približno 8 milijonov primerov na leto s stopnjo smrtnosti 3 milijone na leto.V nekaterih afriških državah z visoko stopnjo okužbe z virusom HIV je smrtnost presegla 50 %.
Začetni klinični sum in radiografski izvidi z naknadno laboratorijsko potrditvijo s pregledom sputuma in kulturo so tradicionalne metode pri diagnozi aktivne tuberkuloze5,6.Vendar pa te metode bodisi niso občutljive bodisi so dolgotrajne, zlasti niso primerne za bolnike, ki ne morejo proizvesti ustreznega izpljunka, so negativni razmazi ali sumijo, da imajo zunajpljučno tuberkulozo.
Kombinirani hitri test TB IgG/IgM je razvit za ublažitev teh ovir.Test zazna IgM in IgG anti-M.TB v serumu, plazmi ali polni krvi v 15 minutah.Pozitiven rezultat IgM kaže na svežo okužbo z M.TB, medtem ko pozitiven odziv IgG kaže na predhodno ali kronično okužbo.Z uporabo specifičnih antigenov M.TB zazna tudi IgM anti-M.TB pri bolnikih, cepljenih z BCG.Poleg tega je test lahko
izvaja neusposobljeno ali minimalno usposobljeno osebje brez okorne laboratorijske opreme.
NAČELO
Hitri test IgG/IgM za tuberkulozo je imunološki kromatografski test z bočnim tokom.Testno kaseto sestavljajo: 1) bordo obarvana konjugirana blazinica, ki vsebuje antigene M.TB, konjugirane s koloidnim zlatom (konjugati M.TB) in konjugati kunčjega IgG-zlata, 2) trak iz nitrocelulozne membrane, ki vsebuje dva testna trakova (trakova M in G). ) in kontrolni pas (pas C).Trak M je predhodno prevlečen z monoklonskim protičloveškim IgM za odkrivanje IgM proti M.TB, pas G je predhodno prevlečen z reagenti za odkrivanje IgG proti M.TB, pas C pa je pred -obložen s kozjim anti-kunčjim IgG.
Ko je ustrezen volumen preskusnega primerka odmerjen v vdolbino za vzorec v kaseti, vzorec migrira s kapilarnim delovanjem po kaseti.Če so IgM anti-M.TB prisotni v vzorcu, se bodo vezali na konjugate M.TB.Imunokompleks se nato ujame na membrano s predhodno obloženim protitelesom proti humanim IgM, pri čemer se tvori bordo obarvan pas M, kar kaže na pozitiven rezultat testa M.TB IgM.Če so IgG anti-M.TB prisotni v vzorcu, se bodo vezali na konjugate M.TB.Imunokompleks nato zajamejo predhodno prevlečeni reagenti na membrani, pri čemer se tvori bordo obarvan pas G, kar kaže na pozitiven rezultat testa M.TB IgG.Odsotnost testnih pasov (M in G) pomeni negativen rezultat.Test vsebuje notranjo kontrolo (C trak), ki mora pokazati bordo obarvan trak imunokompleksa kozjega proti kunčjega IgG/kunčjega IgG-konjugata zlata, ne glede na razvoj barve na katerem koli od T trakov.V nasprotnem primeru je rezultat testa neveljaven in je treba vzorec ponovno testirati z drugo napravo.
